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干貨分享:氨丁三醇(Tris)及鹽酸氨丁三醇(Tris-HCl)固體粉末配置緩沖液

更新時間:2023-10-26   點擊次數:4652次

AVT團隊向您推薦一種操作簡便且復現性較好的緩沖液配制方法:使用氨丁三醇(Tris)及鹽酸氨丁三醇(Tris-HCl)固體粉末進行配制。

 

使用時,可根據目標濃度及pH,計算并直接稱取兩種固體粉末混合,溶解定容,至于兩種固體粉末的用量如何確認,您可以參考以下實驗步驟以及艾偉拓實驗室實測值,通過一個簡單的預實驗進行確認:

 

1. 分別配制目標濃度的Tris與Tris-HCl(這里以0.1mol/L為例)

 

 

2. 兩種溶液分別取不同體積混合成相同體積(這里以100mL為例)的緩沖液,測定溶液pH

 

 

待摸索出兩種溶液適宜比例后,根據計劃配置的緩沖液體積,倒算兩種固體粉末的用量。

 

基于該方法,我們復現了Moderna的xinguanmRNA疫苗中的Tris緩沖溶液,pH理論值為7~8,實測值為7.47(注:該實測值為溶液中only包含Tris/Tris-HCl,不含mRNA-LNP及其他輔料情況下的pH值)。

該方法的優勢是操作簡便,只需稱取及溶解兩步,在外界溫度及溶液濃度相同的情況下,復現性較好,且無需使用濃鹽酸等嚴格受限的試劑。

 

使用該方法配置Tris/Tris-HCl緩沖液的注意事項如下:

 

①為避免Tris-HCl含量波動等因素造成配置的緩沖液pH不穩定,建議采購質量可靠的藥用級Tris及Tris-HCl產品。

 

②濃度及溫度對Tris緩沖液pH均有較大影響,建議做上述實驗時,保持與實際使用場景相同的溫度與濃度,并在配置完成后最快時間進行測量,避免二氧化碳的干擾。

 

③若變更使用濃度或環境溫度,需重新進行上述實驗。

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